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細(xì)胞庫(kù)的凍存數(shù)量與管理方法

日期:2024-09-20 01:09
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摘要:
     原始細(xì)胞庫(kù)的數(shù)量是根據(jù)實(shí)際來(lái)計(jì)算的,每個(gè)品種可能都不一樣。需要考慮后續(xù)生產(chǎn)、檢定需要、保藏年限,檢測(cè)用數(shù)量、復(fù)檢頻率等,主細(xì)胞庫(kù)和工作細(xì)胞庫(kù)凍存多少數(shù)量,根據(jù)你自己的需要確定,只要保證后續(xù)生產(chǎn)、檢定需要足夠即可,即遵循“夠用原則”,多也是浪費(fèi)。一般經(jīng)驗(yàn)來(lái)說(shuō),原始細(xì)胞庫(kù)凍存幾十支,比如20支,主細(xì)胞庫(kù)幾十支,比如50支,工作細(xì)胞庫(kù)一兩百支,比如50-200支,夠生產(chǎn)幾十年了。

    主細(xì)胞庫(kù)和工作細(xì)胞庫(kù)應(yīng)分別存放。每一個(gè)庫(kù)應(yīng)在生產(chǎn)設(shè)施內(nèi)至少2個(gè)不同的地點(diǎn)或區(qū)域存放。應(yīng)檢測(cè)并維護(hù)細(xì)胞庫(kù)凍存容器,以保證細(xì)胞庫(kù)貯存在一個(gè)高度穩(wěn)定的環(huán)境中。

    非生產(chǎn)用的細(xì)胞和生產(chǎn)用細(xì)胞嚴(yán)格分開(kāi)存放。

    每種細(xì)胞庫(kù)均應(yīng)分別建立臺(tái)賬,詳細(xì)記錄放置位置、容器編號(hào)、分裝及凍存數(shù)量,取用記錄等。細(xì)胞庫(kù)中的每支細(xì)胞均應(yīng)具有細(xì)胞系/株名、代次、批號(hào)、編號(hào)、凍存日期,貯存容器的編號(hào)等信息。

    為保證細(xì)胞凍存后仍具有良好的活力,凍存前的細(xì)胞活力應(yīng)不低于90% ,凍存后應(yīng)取一定量的可代表凍存全過(guò)程的凍存管復(fù)蘇細(xì)胞,復(fù)蘇后細(xì)胞的活力應(yīng)不低于80%。二倍體細(xì)胞凍存后,應(yīng)至少做一次復(fù)蘇培養(yǎng)并連續(xù)傳代至衰老期,檢查不同傳代水平的細(xì)胞生長(zhǎng)情況。細(xì)胞凍存后,可通過(guò)定期復(fù)蘇細(xì)胞及復(fù)蘇后細(xì)胞的活力數(shù)據(jù)驗(yàn)證細(xì)胞在凍存及貯存條件下的穩(wěn)定性。

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